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当前,吸入毒理学研究仍以传统的在体动物试验为主,应用实验动物进行口鼻式吸入染毒或整体暴露染毒。然而动物试验操作复杂、周期长、成本较高,而且动物与人体之间存在种属差异、呼吸道结构功能差异等问题。随着 3R 原则的倡导及体外替代方法的发展,细胞体外暴露试验在吸入毒理学研究中的应用越来越多,在欧盟,细胞体外暴露试验已应用于替代化学品及化妆品领域的动物试验研究,进而在细胞水平了解毒理、生理及药理上的变化影响。
细胞体外暴露试验用于毒性评估的体外替代试验用时短,试验条件和因素较为可控,试验设计相对方便;通过对离体细胞或组织的培养,可以对受试物毒性或其他相关特性进行准确、定量的研究。传统细胞体外暴露方法是需要暴露的物质溶于培养液,然后到达细胞表面,通过细胞与培养液相互作用的方式进行进行染毒实验。对于一些细胞,如肺内上皮细胞,这种方式有别于真实的气液界面暴露环境,且暴露效率较低。特别是对于含颗粒物的气体来说,无法通过这种方式进行体外暴露。由于浸没式体外暴露方式的不足,科学家们开始探索一种新的能够更加真实模拟体内生物效应的体外暴露染毒技术。早在1975年,Voisin等人提出的气液界面体外暴露染毒(ALI, air/liquid interface)的描述,这一描述为体外培养肺细胞的气液界面暴露(ALI)提供了依据。这一理论中细胞既可以通过底膜获取培养基,保证了细胞的体外存活率,又可实现与顶部与气体(含受试物质气溶胶)直接暴露。
塔望科技可以为客户提供全面ALI细胞暴露系统,用以评估颗粒或气态污染物、气溶胶等对细胞毒性的影响。细胞通过 Transwell 膜技术进行 ALI 气液界面培养,继而应用暴露系统将其暴露于可吸入物质进行染毒。由于染毒时细胞表面暴露于染毒物质,膜基底面处于培养基中,因此该方式模拟了可吸入物质进入人体内的过程。
几种暴露培养方式的对比:ALI气液界面培养、Transwell培养暴露、细胞培养皿培养暴露
气/液界面培养与暴露,模拟真实的暴露环境,更好气溶胶分布和沉积
系统主要组成:
- 染毒物质的发生器:液体气溶胶发生器、干粉气溶胶发生器、香烟烟雾发生器、纳米粒子气溶胶发生器、PM2.5、气瓶(臭氧、H2S、SO2等)。
- 气溶胶或气体的调理:监测并控制气溶胶的浓度和染毒剂量,系统能准确控制样品稀释与暴露流量;各孔道流量分配均匀。
- 细胞恒温培养模块:Transwell小室安装方便,培养液可以动态循环供给,以保证细胞良好的生长。具有恒温功能,温控范围室温~50℃,控制精度:±0.1℃。每个模块,包含6个细胞培养小室。细胞培养模块采用金属材质,可完全高温高压消毒灭菌。
- 废气处理系统:完善的废气处理,确保实验室安全,废气排放达到国家安全排放标准。
- 可选择气溶胶浓度检测功能:气溶胶的浓度通过进口检测器实时监控,可通过液晶屏直接读取数据,也可通过电脑软件读取,数据可保存。
- 软件监控系统:通过软件,对整体实验进行监测和控制。
我公司可提供3Q验证,协助客户对系统进行全方面的验证。
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